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实验室常用高压蒸汽灭菌器的使用及注意事项

作者:佚名    出处:佚名    浏览次数:941(2016/9/26)

高压蒸气灭菌技术是利用灭菌器加热产生蒸气,随着蒸气压力不断增加,灭菌器内温度随之升高,可以达到超过100℃的高温。高压蒸汽灭菌内的高压蒸汽具有潜热大,穿透力强,传导快,能使微生物的蛋白质较快变性或凝固从而达到灭菌效果。高压灭菌技术是保证实验室无菌操作和实现生物安全的基本技术,高压蒸汽灭菌技术可以有效防止杂菌污染实验材料,特别是在要求严格无菌操作的试验中,灭菌是试验能否成功的关键环节。现就我们实验室常用的高压蒸汽灭菌器的使用方法及注意事项总结如下以供参考。

1、在实验室要进行试验器材灭菌时,接通电源后应先观察水位,看是否有水,待灭菌的物品放置不宜过紧。

2.开启高压灭菌器电源后,必须先检查水位是否在限定范围内,若水位过低,应及时补足水量到合适范围,方可使用。

3.按灭菌材料需要,正确设定灭菌的温度和时间。

4.在灭菌过程中,必须先将冷空气充分排除,然后将放气阀关闭,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌效果(非自动灭菌器)。

5.试验器材灭菌完毕后,不可直接放气减压,否则瓶内液体会剧烈沸腾,冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

6.在进行高压灭菌时,灭菌人员不应离开现场,随时观察仪器运行情况,发现情况随时处理。

7.装培养基的试管或瓶子的棉塞上,应包油纸或牛皮纸,以防冷凝水入内。

8.为了确保灭菌效果,应定期检查灭菌效果,常用的方法是将硫磺粉末(熔点为115℃)或安息香酸(熔点为120℃)置于试管内,然后进行灭菌试验。如上述物质熔化,则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求,灭菌的效果是可靠的。也可将检测灭菌器效果的胶纸(其上有温度敏感指示剂)贴于待灭菌的物品外包装上,如胶纸上指示剂变色,亦说明灭菌效果是可靠的。

使用方法

(1)在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。

(2)加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到33.78kPa时,打开排气阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。

(3)继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到所需压力时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所需压力一定时间,然后将灭菌器断电或断火,让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物。

2.注意事项:

(1)待灭菌的物品放置不宜过紧。

(2)必须将冷空气充分排除,否则锅内温度达不到规定温度,影响灭菌效果。

(3)灭菌完毕后,不可放气减压,否则瓶内液体会剧烈沸腾,冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

(4)装培养基的试管或瓶子的棉塞上,应包油纸或牛皮纸,以防冷凝水入内。

(5)为了确保灭菌效果,应定期检查灭菌效果,常用的方法是将硫磺粉末(熔点为115℃)或安息香酸(熔点为120℃)置于试管内,然后进行灭菌试验。如上述物质熔化,则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求,灭菌的效果是可靠的。也可将检测灭菌器效果的胶纸(其上有温度敏感指示剂)贴于待灭菌的物品外包装上,如胶纸上指示剂变色,亦说明灭菌效果是可靠的。

(6)现在已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌器,只需放去冷气后,仪器即可自动恒压定时,时间一到则自动切断电源并鸣笛,使用起来很方便。

3.应用:为最常用的灭菌方法,一般以101.33kPa处理15~20min,可达到对物品进行灭菌的目的。凡耐高温和潮湿的物品,如常用培养基、生理盐水、衣服、纱布、玻璃器材等都可用本法灭菌。


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